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2020-12-31
基因编辑、基因敲除小鼠模型基本流程
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       什么是基因编辑?

       基因编辑是指通过添加、替换和删除 DNA 碱基直接改变 DNA 序列的方法。



       CRISPR/CAS 是细菌的一种免疫防御机制,通过短 RNA 可特异性切断噬菌体 DNA 序列。利用该原理,在真核生物 DNA 上产生缺口,启动损伤修复,实现基因编辑。


全身基因敲除小(仓)鼠服务


      采用 CRISPR/CAS9 短的非编码 RNA 指导的 DNA 核酸内切酶系统,在基因组上产生突变或缺失,获得基因敲除小(仓)鼠。  

特色:采用 CS-STOP 的方法,同时获得 CS-STOP 基因敲除小鼠和移码突变小鼠,在二代以内获得可用于观察表型的纯合敲除小鼠。

服务流程

     条件型全身基因敲除小(仓) 鼠服务采用 CRE/LOXP 同源重组系统,根据客户需要,在基因组序列上插入同向双 LOXP 序列


       获得条件型基因敲除小(仓)(CKO) 鼠。当 CKO 小鼠与组织特异性表达 Cre 酶的工具鼠进行配繁,根据 CRE 表达,在特异性的组织或细胞中敲除。

条件型敲除流程

       设计特异性同源突变位点,采用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术,修饰小鼠基因组序列,导入突变或外源基因, 建立拟人化临床疾病突变病模型。

       小鼠仓鼠活体细胞荧光示踪模型细胞分化和个体发育是由基因的时空表达差异决定的。


       利用 CAS9 技术, 可以在基因编码的 5’ATG 起始端或终止子,插入荧光蛋白报告基因,示踪基因的时空表达谱。










作者:未知 来源:丁香通
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