在传染病的世界里,总有一些“隐藏杀手”威胁着人类健康,发热伴血小板减少综合征(SFTS)就是其中之一。今天,就让我们一同走进一项关于SFTS疫苗研究的前沿成果,看看作者如何在对抗这一疾病的道路上披荆斩棘。
疾病威胁:SFTS,不可忽视的健康隐患
发热伴血小板减少综合征,是由蜱传的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)引发的传染病。想象一下,当人们在户外活动,与大自然亲密接触时,小小的蜱虫可能就会带来大麻烦。近年来,人类因接触蜱虫,甚至是受感染犬只而中招的情况屡见不鲜,可令人揪心的是,目前还没有能够有效预防它的疫苗。SFTSV 就像一个狡猾的敌人,其包膜上的两种糖蛋白 Gn 和 Gc 是它重要的 “武器装备”,同时也是我们研发疫苗的关键靶抗原。如何攻克这一难题,成为了作者的紧迫任务。
科研突破:AAV9 - SFTSV 疫苗的诞生与验证
作者利用腺相关病毒(AAV)载体,构建了新型 SFTS 疫苗候选物,为对抗 SFTS 带来了新希望。AAV 载体在基因治疗领域已经证实了其安全性,并且在流感和 SARS-CoV-2 疫苗的研发中崭露头角。研究中,作者生产出了两种疫苗:AAV9 - SFTSV Gn 和 AAV9 - SFTSV Gc。在实验室里,通过严谨的检测,证实了在 HEK293T 细胞中,这两种疫苗能有效表达 Gn 和 Gc 蛋白。接着,作者将疫苗接种到小鼠体内,发现小鼠血清产生了针对 SFTSV 的抗体,尤其是 AAV9 - SFTSV Gn 感染的小鼠血清,展现出的动物中和能力与之前报道的优秀 SFTS 疫苗候选物相当。
实验揭秘:ELISA 实验与免疫原性评估
为了深入了解疫苗的效果,作者进行了一系列关键实验。其中,酶联免疫吸附试验(ELISA)就是一项重要 “侦查手段”。ELISA 实验过程就像一场精密的 “舞蹈”:把感染 SFTSV 的 Huh7 细胞裂解液当作 “诱饵”,在 4°C 下孵育过夜,包被 96 孔板,同时设置未感染细胞裂解液作为阴性对照。之后,用 TBS - T 洗涤、Blocking One 封闭(nacalai tesque,半井)等一系列操作,就像给实验做好了前期准备工作。再加入稀释后的感染小鼠血清、二抗,最后用 ELISA POD Substrate TMB Kit(nacalai tesque,半井)显色,通过精确计算测量值和截止值,确定血清中抗体的极限稀释度。而在对 AAV9 - SFTSV 疫苗免疫原性评估时,发现 Gn 接种组平均抗体产生为 2350 倍稀释,但个体差异较大;Gc 接种组则表现更优,平均抗体产生达到 55200 倍稀释,所有小鼠抗体稀释度都超过 4800 倍,显著高于 Gn 接种组。
结论
这项研究无疑是 SFTS 疫苗研发道路上的一座重要里程碑。AAV9 - SFTSV 疫苗不仅能有效诱导小鼠产生抗体,还展现出良好的免疫原性和安全性,它能高效递送到注射肌肉,还会扩散到肝脏、脾脏等器官,却没有对小鼠身体状况产生明显不良影响。但科研之路没有尽头,后续还需要进一步优化 AAV9 - SFTSV 疫苗,开展更多研究。相信在科研人员的不懈努力下,我们离彻底战胜 SFTS 这一疾病的日子越来越近,未来人们在面对这一健康威胁时,也将拥有更强大的防护盾牌。
如果你对这项研究中使用的 Nacalai tesque(半井)的 Blocking One 和 ELISA POD Substrate TMB Kit 等实验材料感兴趣,欢迎联系我们或评论区留言讨论哦!
文献名:Potent immunogenicity and neutralization of recombinant adeno-associated virus expressing the glycoprotein of severe fever with thrombocytopenia virus
期刊:Journal of Veterinary Medical ScienceDOI: 10.1292/jvms.23-0375
相关产品: